유전공학 실험 - PCR과 Transformation

유전공학 실험 - PCR과 Transformation

유전공학 실험 - PCR과 Transformation.hwp

본문 PCR과 Transformation 실험 일시 : 1. Introduction 유전자를 cloning하여 vector에 주입하여 대장균에 주입하여 발현 정도를 관찰한다. 2. Materials DNA template, primer, DW, DNA polymerase & Buffer, dNTPs (dATP, dGTP, dCTP, dTTP), PCR tube, micro pipette, column, buffer PB, buffer NW, buffer EB, T vector, 2X Rapid Ligation Buffer, pGEM®-T or pGEM®-T Easy Vector (50 ng), PCR product, T4 DNA Ligase, gel, 도말 plate, 따뜻한 물, shaking machine 3. Methods 1) 형광 발현 유전자를 PCR로 cloning한다. ① 튜브에 DNA template 1㎕, FW primer 2㎕, RV primer 2㎕, DW 15㎕를 넣으려고 하였으나 실패의 가능성이 있으므로 각각 2배의 양으로 한다. ② 그 다음 polymerase, buffer들이 있는 PCR tube에 옮겨 담은 다음 잘 섞이도록 pipetting을 해준다. PCR tube에는 라벨링을 한다. ▶ PCR tube 속에 있는 파란 물질은 염색을 하기 위한 용도로 전기영동 시에 홈에 주입하였는지 확인을 더 쉽게 할 수 있다. 참고문헌 6. References http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=134418321&qb=dCB2ZWN0b3I=&enc=utf8§ion=kin&rank=2&search_sort=0&spq=1&pid=RNtncc5Y7thssaZ5alwsssssssG-503789&sid=UcBO73JvLCcAAAevRhk 하고 싶은 말 키워드 공학, 유전공학, 실험